Tất cả 46 quốc gia trực thuộc AFC và FIFA đều đủ điều kiện tham dự vòng loại. Đội chủ nhà Cúp bóng đá châu Á 2027 Ả Rập Xê Út cũng sẽ tham dự vòng loại để tranh suất tham dự vòng chung kết World Cup theo thể thức chung. Bảng xếp hạng thế giới FIFA của các quốc gia AFC tại thời điểm bốc thăm được sử dụng để xác định quốc gia nào sẽ phải tham dự vòng 1 và việc sắp xếp hạt giống trong lễ bốc thăm vòng 2. Đối với việc sắp xếp hạt giống trong lễ bốc thăm vòng 3, bảng xếp hạng FIFA gần nhất trước lễ bốc thăm đó sẽ được sử dụng.

Sri Lanka bị cấm vào tháng 1 năm 2023 do sự can thiệp bên ngoài từ chính phủ, nhưng sau đó AFC và FIFA đã cho phép Sri Lanka tham gia lễ bốc thăm với điều kiện Liên đoàn bóng đá Sri Lanka phải tổ chức bầu cử trước ngày 2 tháng 10 (10 ngày trước lượt đi vòng 1), nếu không họ sẽ bị cấm tham gia thi đấu ở vòng loại này. Vào ngày 27 tháng 8, FIFA đã chính thức gỡ bỏ lệnh cấm với Liên đoàn bóng đá Sri Lanka sau khi họ chấp nhận trở lại với các hoạt động bóng đá và quyết định sẽ bầu ra một chủ tịch mới vào ngày 29 tháng 9, qua đó giúp cho đội tuyển quốc gia nước này có thể tham dự vòng loại.

Vì Quần đảo Bắc Mariana chỉ là một thành viên của AFC mà không thuộc FIFA, họ sẽ tham gia vòng play-off của vòng loại Cúp bóng đá châu Á 2027.[3]

Lễ bốc thăm chia cặp vòng 1 và chia bảng cho vòng 2 được tổ chức vào ngày 27 tháng 7 năm 2023.